昨日（6月1日），在佰傲谷發(fā)布的《療效再下降，BioMarin血友病基因療法更新數(shù)據(jù)》一文中提到，BioMarin CEO曾表示，即使療效耗盡，新技術(shù)也可能讓再次基因療法再次給藥成為現(xiàn)實。

無巧不成書，昨日，BioMarin血友病基因療法主要競爭對手之一，另一基因療法主要玩家Spark Therapeutics在Nature: Medicine上發(fā)表了題為“IgG-cleaving endopeptidase enables in vivo gene therapy in thepresence of anti-AAV neutralizing antibodies”文章，為解決腺病毒載體（AAV）基因療法所面臨的由AAV抗體所導(dǎo)致的療效下降和難以重復(fù)用藥等問題，提供了新的潛在解決方案。

Spark表示，使用IgG降解酶IdeS進行治療，可以迅速且短暫的消除抗AAV IgG，從而恢復(fù)基因療法的效果。

AAV基因療法的挑戰(zhàn)

AAV的普遍流行導(dǎo)致AAV中和抗體廣泛存在于人群中。據(jù)了解，人群中AAV中和抗體的血清陽性率可觀，AAV1, 2, 5, 6, 8, 9分別在大約67%，72%，40%，46%，30%和47%的健康人中呈陽性。

AAV中和抗體的高陽性率和其阻斷肝臟轉(zhuǎn)導(dǎo)和載體再調(diào)節(jié)的作用，很大程度上影響了以AAV為載體的基因療法的效果，是基因療法的主要限制之一。除此之外，基因治療后，高滴度的抗AAV抗體出現(xiàn)并且長期存在，給基因療法的再次給藥提出了嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。

目前，為了解決這一問題，許多研究都選擇運用免疫抑制來克服抗AAV抗體這一策略，但這類辦法在清除已存在的抗體方面效率不高。

IdeS短暫清除抗體是AAV載體基因療法的完美搭檔

Spark Therapeutics的CSOFederico Mingozzi表示：“我試著對AAV的免疫反應(yīng)進行分層，而抗體就是第一層，是實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)導(dǎo)時遇到的第一個障礙?！?

本研究中，研究人員們探索了利用從化膿性鏈球菌中提取的IgG降解酶作為一種策略來解決AAV中和抗體的局限性。Imlifidase（IdeS）是一種內(nèi)肽酶，可以在短暫時間內(nèi)將人IgG裂解為F(ab‘)2和Fc片段，這一點在抗體介導(dǎo)的移植物排斥反應(yīng)和肝素誘導(dǎo)的血小板減少臨床研究中得到了驗證。

對此，Mingozzi表示，IdeS優(yōu)秀的安全性和短暫的抗體分解作用對基因療法來說是完美的?！盎旧?，你所需要的是一段可以注射載體并讓載體到達目標(biāo)組織的時間。一旦載體進入細胞就不受抗體的影響了，這段時間通常只有幾小時”，Mingozzi說。

在Spark的研究中，研究人員首先發(fā)現(xiàn)在被動靜脈注射Ig的小鼠中，IdeS可以降低抗AAV抗體的水平并使轉(zhuǎn)基因表達和肝臟基因轉(zhuǎn)導(dǎo)顯著增加。

IdeS可降解AAV抗體，并使被動免疫IVIg小鼠肝轉(zhuǎn)導(dǎo)成功

之后，該方法被擴展到非人類靈長動物，即野生型AAV的自然宿主，研究人員發(fā)現(xiàn)在進行AAV載體注射前（攜帶因子IX基因的AAV8載體）進行IdeS治療是安全的，并且觀察到再次注射AAV載體也可以增強肝臟轉(zhuǎn)導(dǎo)。

預(yù)先存在AAV抗體的非人靈長類動物中，IdeS治療可以增強轉(zhuǎn)導(dǎo)作用

IdeS治療使得非人靈長類動物再次接受AAV-LK03載體成為可能

最后，研究人員們在人血漿樣本的實驗中也觀察到了同樣的效果，這些樣本包括了基因療法試驗參與人員的血漿。

IdeS對人血漿中IgG的高效裂解

Mingozzi表示：“IdeS不僅對已存在的抗體起作用，也會對載體給藥后新產(chǎn)生抗體起作用，這一發(fā)現(xiàn)十分令人驚訝，因為后者有望激發(fā)顯著而持久的療效。”

基因療法復(fù)用一直是研究人員們所希望攻克的難題。原因是，現(xiàn)有的基因療法療效可能隨著時間的推移而減弱，這個問題對于在嬰兒期就接受治療的患者來說至關(guān)重要。Spark希望，這項技術(shù)能擴展AAV載體基因療法的可能性。據(jù)了解，Spark已經(jīng)圍繞IdeS的特殊用途申請了專利。臨床前研究，包括GLP毒理研究正在推進中。屆時Spark基因療法研發(fā)團隊將與監(jiān)管機構(gòu)共同討論，如何重新設(shè)計和評估納入了AAV抗體陽性患者的臨床研究。

原文參考：IgG-cleaving endopeptidase enables in vivo gene therapy in the presence of anti-AAV neutralizing antibodies