2016年7月，Nature雜志題為“Chinese scientists to pioneer first human CRISPR trial”的報道稱，中國科學家將開展全球首個CRISPR人體試驗。四川大學華西醫(yī)院腫瘤學家盧鈾教授研究小組計劃利用CRISPR技術編輯的T細胞（敲除PD-1基因）治療化療、放療以及其它療法治療無效的轉(zhuǎn)移性非小細胞肺癌患者[1]。

同年11月，Nature的另一篇報道證實，2016年10月28日，盧鈾教授團隊已將經(jīng)CRISPR編輯的T細胞注射到1例肺癌患者體內(nèi)，代表這一評估PD-1敲除T細胞治療晚期非小細胞肺癌的I期臨床試驗（NCT02793856）邁出了重要一步[2]。

來源：Nature Medicine

2020年4月27日，在最新發(fā)表于Nature Medicine 雜志上的一篇論文中，盧鈾教授及其合作者公布了該試驗的結(jié)果[3]。

試驗共招募了22例患者，12例患者接受了治療，11例患者臨床活性可評估（1例患者提前退出了研究）。主要終點是安全性和可行性，次要終點是有效性。

表1 治療相關不良事件總結(jié)

來源：Nature Medicine

研究結(jié)果顯示，所有治療相關不良事件均為1/2級，較常見的包括淋巴細胞減少癥、疲勞、白細胞減少癥、發(fā)熱、關節(jié)痛和皮疹。不良事件的嚴重程度似乎與劑量無關(表1)。截至2020年1月31日中位隨訪47.1周后，12例患者均未顯示治療相關嚴重不良事件。

患者接受基因編輯T細胞治療后的臨床結(jié)果，彩條代表PFS時間（來源：Nature Medicine）

有效性方面，研究顯示，基因編輯T細胞回輸后可在外周血中檢測到?；颊咧形粺o進展生存期（PFS）為7.7周，中位總生存期為42.6周。無患者獲得部分緩解，最好的情況是2例患者出現(xiàn)過病情穩(wěn)定，截至2020年1月31日，所有患者病情進展。

脫靶效應方面，通過下一代測序分析顯示，18個候選位點中位脫靶事件發(fā)生率為0.05%。

基于以上數(shù)據(jù)，研究者們認為，該研究證明了靶向PD-1的CRISPR基因編輯T細胞在一個晚期肺癌患者隊列中的安全性和可行性。然而，考慮到該研究中使用的技術的局限性，未來的試驗需要使用更優(yōu)化的基因編輯途徑來提高治療的有效性。

圖片來源：ASH年會官網(wǎng)

基因編輯技術CRISPR為增強人類T細胞的天然抗癌能力提供了強有力的工具。事實上，去年11月，美國首個CRISPR免疫療法臨床試驗（NCT03399448）的數(shù)據(jù)已率先在第61屆美國血液學會（ASH）年會的摘要中公布。由賓夕法尼亞大學Perelman醫(yī)學院的血液學家Edward Stadtmauer教授領導的研究證實，利用CRISPR編輯的T細胞治療癌癥安全性良好?；颊咴诮邮苤委?個月后，沒有明顯的不良反應[4]。

癌癥患者中的CRISPR-Cas9工程T細胞（來源：Science）

具體來說，Stadtmauer教授團隊首先通過抽血從3例癌癥患者（2例晚期難治性骨髓瘤患者和1例轉(zhuǎn)移性肉瘤患者）身上提取了T細胞，然后利用CRISPR技術對T細胞的DNA進行改造：刪除TCRα、TCRβ以及PD-1這三個基因。刪除TCRα和TCRβ可確保T細胞與癌細胞的正確部位結(jié)合，刪除PD-1可抑制其阻斷T細胞發(fā)揮抗癌作用的功能。這些改造完成后，研究人員接著利用慢病毒插入一個親和力被增強的T細胞受體基因，使得被基因編輯的T細胞可靶向癌細胞上名為NY-ESO-1的抗原（很少有正常組織表達該抗原）。最后，經(jīng)過多重改造的T細胞被回輸?shù)交颊唧w內(nèi)。研究顯示，上述3例患者均對治療耐受良好。該研究中，脫靶效應也很罕見。

NYCE（NY-ESO-1 transduced CRISPR 3X edited）T細胞回輸后的臨床響應和患者結(jié)果（來源：Science）

療效方面，在3例患者中，研究人員觀察到的最佳響應是病情穩(wěn)定。不過，一個積極的現(xiàn)象是，所有患者中基因編輯T細胞均在至少9個月內(nèi)處于穩(wěn)定水平。Stadtmauer教授表示，在治療9個月后依然能在患者體內(nèi)看到回輸進去的細胞很令人高興。這表明，這些細胞可在腫瘤周圍做持續(xù)的監(jiān)測。

2月6日，這些研究結(jié)果也已正式在發(fā)表于Science雜志上的一篇論文中公布[5]。科學家們認為，這些令人鼓舞的結(jié)果為進一步開展試驗調(diào)查基于CRISPR技術的癌癥免疫療法鋪平了道路。

參考資料：

[1] Chinese scientists to pioneer first human CRISPR trial (來源：Nature)

[2] CRISPR gene-editing tested in a person for the first time (來源：Nature)

[3] You Lu et al. Safety and feasibility of CRISPR-edited T cells in patients with refractory non-small-cell lung cancer. Nature Medicine (2020).

[4] Early Results from First-In-U.S. Trial of CRISPR-Edited Immune Cells for Cancer Patients Suggest Safety of Approach（來源：賓夕法尼亞大學）

[5] Edward A. Stadtmauer et al. CRISPR-engineered T cells in patients with refractory cancer. Science（2020）.